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工业杀菌剂的筛选"最低保护浓度法"
访问数:35       最后更新: 19-08-06 10:34:04       打印
工业杀菌剂的筛选"最低保护浓度法"

        有杀菌作用的化合物很多,但能满足各项要求而可用作工业杀菌剂的却很少。例如,为寻求用于纺织品的杀菌剂,1934年前已试验过800余种化合物,其中有130余种在纺织品上试验过。在1951年出版的《纤维素的微生物降解》一书中介绍试用于纺织品上的化合物已超过800种3。但是,直到1966年,用于纺织品的常用杀菌剂商品还不到100种,其中只包括数十种化合物261,常用的就更少了。
        因此,某种工业产品所需的杀菌剂,往往必须按要求从已知杀菌剂中筛选。直接搬用任何一种已知杀菌剂到某种工业产品中,效果常常不理想。如果已知杀菌剂不能满足要求,则必须从新合成的化合物中筛选。
筛选合适的杀菌剂,一般必须经过三个阶段。首先是直接在接种了试验菌的培养基上测定供试化合物的杀菌力,选出杀菌性能强的;其次是将选出的化合物加至实物样品上,在实验室里进行人工加速长霉试验,以削除不能保留其杀菌力或对其他质量指标有不良影响的化合物最后将药剂加至实物上投人实际使用或天然暴露试验,作最后判断。
        由于商品性质的不同,使用环境的差别,对杀菌剂有不同的要求,因而研究者应按照各自的需要和设备情况设计了各式各样的筛选方法。这里只能介绍常用和比较有代表性的简捷筛选方法。
最低保护浓度法
        此方法是用灭菌的干燥圆滤纸片浸于待测化合物之一系列丙酮溶液或悬浮液中二分钟,该溶液或悬浮液之浓度由高至低改变。取出圆滤纸片在室温下晾干,置于已混有霉菌孢子悬液并已凝固之察氏培养基上。保温培养一周后,寻求霉菌菌丝恰好生长蔓延到达滤纸边缘的浓度,即为最低保护浓度。最低保护浓度法所指的浓度并不是滤纸上化合物的真正浓度。滤纸上化合物的浓度受多种因素影响,这些因素包括滤纸对化合物的吸附力,培养过程中化合物在培养基中的溶解度和扩散速度等。相同浓度的溶液吸附力大、溶解度和扩散速度都小的化合物在滤纸上能保留较高浓度,表现出较大的杀菌力,因而测定时最低保护浓度较低;反之亦然。因此,这种方法是假定同种化合物吸收至滤纸上的量与浸泡滤纸的药液浓度保持固定的比例关系,同时在忽略不同化合物之间吸附能力、溶解度和扩散速度的差别的前提下,对它们的杀菌能力进行比较的。如有必要,这对滤纸上的药剂进行分析,求得滤纸上化合物的真实浓度。
        采用这种方法时,化合物的杀菌力,是以抑制蕾丝生长的形式表现出来的。所测得的最低保护浓度高于最低抑制浓度,比较接近于实用的防霉浓度。
        不论何种杀菌剂,真正用于产品中时的浓度都高于用上述方法测得的杀菌浓度。究竟应该比测得的浓度高多少,因杀菌剂和应用于何种产品而异,在培养基上的杀菌浓度和实际使用浓度之间没有固定的比例关系。经验告诉我们,在培养基上表现杀菌浓度较高的杀菌剂,实际使用时浓度可增加较少。例如以黑曲作测定菌,五氯酚的最低保护浓度是400毫克/升,醋酸苯汞是18毫克/升(见43页表4在实际用于油漆时,五氯酚的浓度只需增大100倍,即35%,醋酸苯汞则需增加200—300倍,达到0.5.0%,才能有效地防霉。